Estrés oxidativo en células endoteliales inducido por el suero de mujeres con diferentes manifestaciones clínicas del síndrome antifosfolípido / Oxidative stress in endothelial cells induced by the serum of women with different clinical manifestations of the antiphospholipid syndrome

Introducción. El síndrome antifosfolípido se caracteriza por la presencia persistente de anticuerpos antifosfolípidos y manifestaciones clínicas de trombosis o morbilidad gestacional, las cuales se asocian con estrés oxidativo y disfunción endotelial. Objetivo. Evaluar los marcadores de estrés oxidativo en células endoteliales, inducidos por el suero de mujeres con diferentes manifestaciones clínicas del síndrome antifosfolípido y analizar la capacidad antioxidante de los sueros. Materiales y métodos. Se incluyeron 48 mujeres que fueron clasificadas así: presencia de anticuerpos antifosfolípidos y criterios clínicos de morbilidad gestacional, trombosis vascular o ambas. Como grupos control se incluyeron mujeres negativas para anticuerpos antifosfolípidos. En un modelo in vitro de células endoteliales estimuladas con los sueros de las mujeres del estudio, se determinaron algunos marcadores de estrés oxidativo por citometría de flujo. También, se analizó la capacidad antioxidante de los sueros incluidos. Resultados. Los sueros de los grupos de mujeres con síndrome antifosfolípido que presentaban trombosis, con morbilidad gestacional o sin ella, generaron un incremento significativo (p<0,05 y p<0,001)en los marcadores de estrés oxidativo endotelial, en contraste con el control de suero humano normal. No se observaron diferencias en el efecto de los sueros de los diferentes grupos de estudio sobre la lipoperoxidación endotelial. Tampoco se encontró diferencia en la actividad antioxidante de los sueros. Conclusión. El estrés oxidativo mitocondrial en el endotelio se asocia con la presencia de trombosis. Sin embargo, cuando esta se asocia con morbilidad gestacional, también se genera estrés oxidativo intracelular.

Introduction: The antiphospholipid syndrome is characterized by the persistent presence of antiphospholipid antibodies and clinical manifestations of thrombosis or gestational morbidity that are associated with oxidative stress and endothelial dysfunction. Objective: To evaluate markers of oxidative stress in endothelial cells induced by the serum from women with different clinical manifestations of the antiphospholipid syndrome, and to analyze the antioxidant capacity of the sera. Materials and methods: We included 48 women who were classified as follows: presence of antiphospholipid antibodies and clinical criteria of gestational morbidity alone, vascular thrombosis only, and gestational morbidity/vascular thrombosis. Control groups included antiphospholipid antibodies negative women. In an in vitro model of endothelial cells stimulated with sera from women included in the groups, some markers of oxidative stress were determined by flow cytometry. The antioxidant capacity in the sera of these women was analyzed. Results: The sera from the groups of women with antiphospholipid syndrome that presented thrombosis, with or without gestational morbidity, generated a significant increase (p<0.05 and p<0.001) in endothelial oxidative stress markers in contrast to the control of normal human serum. There were no differences in the effect of the sera from the different study groups on endothelial lipid peroxidation. Also, there was also no difference in the antioxidant activity of the sera. Conclusion: Mitochondrial oxidative stress in the endothelium is associated with the presence of thrombosis; instead, its association with gestational morbidity generates intracellular oxidative stress.

Evaluación de estrés nitrosativo y oxidativo en mujeres con diferentes manifestaciones clínicas del síndrome antifosfolipídico / Evaluation of nitrosative stress and oxidative in women with different clinical manifestations of the antiphospholipid syndrome

Introducción:El síndrome antifosfolipídico (SAF) es una enfermedad autoinmune caracterizada por la presencia persistente de anticuerpos antifosfolípidos (aAFL) y manifestaciones clínicas de trombosis y/o morbilidad gestacional que se asocian con estrés nitrosativo/ oxidativo y disminución de la capacidad antioxidante, alterando el desarrollo gestacional. Objetivo: Evaluar algunos biomarcadores de estrés nitrosativo/oxidativo del suero de mujeres con diferentes manifestaciones clínicas del SAF y sus efectos en células endoteliales. Métodos: Se incluyeron sueros de 48 mujeres divididas en dos grupos con y sin aAFL. Se evaluó la concentración de nitritos, la capacidad antioxidante y la actividad de la enzima paraoxonasa

Remodelación vascular como modelo in vitro para el estudio del síndrome antifosfolipídico obstétrico / Vascular remodeling as in vitro model for the study of the obstetrical antiphospholipid syndrome

Introducción y Objetivo: Los anticuerpos antifosfolípidos (aAFL) se pueden unir a las células trofoblásticas o a las endoteliales, alterando la remodelación vascular y consecuentemente la placentación normal. El objetivo fue evaluar el efecto del suero de pacientes con síndrome antifosfolipídico (SAF) obstétrico en la interacción endotelio-trofoblasto utilizando un modelo in vitro tridimensional de remodelación vascular. Métodos: Las pacientes con aAFL fueron clasificadas en dos grupos: morbilidad gestacional y trombosis (MG/TV, n=7) y morbilidad gestacional sola (MG, n=8). Como control, se incluyeron mujeres sin aAFL con MG (MG/ aAFL-, n=10), y mujeres sanas (SHN, n=7). Células endoteliales HUVEC fueron cultivadas en Matrigel™ hasta formar estructuras tubulares (angiogénesis) y luego se adicionaron células trofoblásticas HTR8; estas células invaden las estructuras tubulares de las células endoteliales mejorando su estabilidad. Se evaluó el efecto de 10% del suero de las mujeres del estudio sobre esta interacción.

Síndrome antifosfolipídico: una aproximación desde la glicobiología / Antiphospholipid syndrome: an approach from the glycobiology

Introducción: La glicosilación es una modificación postraduccional que tiene un papel protagónico en los procesos de comunicación célula-célula, célula-matrix extracelular, por lo tanto modula la interacción con antígenos y el sistema inmune. La inmunoglobulina G (IgG) tiene un sitio de N-glicosilación en la posición 297. Los sacáridos terminales de este glicano impactan la función efectora de la proteína, dirigiendo la respuesta hacia un efecto proinflamatorio o antiinflamatorio. Maverakis. et al (2015), propusieron que cada enfermedad autoinmune tiene una única marca de glicanos, especialmente en las diferentes clases de inmunoglobulinas (teoría de la alteración de los glicanos en la autoinmunidad).

Estrés oxidativo: ¿un estado celular defectuoso para la función espermática? / Oxidative stress: a defective cell state for sperm function?

En los organismos vivos, las cantidades de radicales libres y especies reactivas del oxígeno (ROS) son controladas por un complejo sistema de homeostasis, capaz de mantener niveles fisiológicos de ROS necesarios para el funcionamiento y regulación de algunas biomoléculas. Paralelamente, los organismos poseen sistemas bioquímicos de protección contra el estrés oxidativo, que consiste en el desbalance entre la producción de especies químicas altamente reactivas y las defensas antioxidantes de la célula. Dicho estrés contribuye de manera importante a la etiología tanto de la senescencia celular como de algunas enfermedades. En el contexto reproductivo, las células espermáticas pasan por una serie de cambios fisiológicos durante los procesos de maduración, capacitación y fecundados, entre los que se incluyen las modificaciones de las proteínas existentes, reguladas por señales procedentes del entorno espermático, donde las ROS modulan importantes vías bioquímicas, involucradas en procesos fundamentales de la función del espermatozoide y que se pueden alterar en estados de estrés oxidativo. El objetivo de esta revisión de literatura es describir algunos de los procesos que contribuyen al estrés oxidativo y sus implicaciones sobre la funcionalidad espermática.

Living organisms regulate the load of free radicals and reactive oxygen species (ROS) by a complex homeostatic system, capable of maintaining physiological levels of ROS, necessary for the action and regulation of some biomolecules. In parallel, organisms harbor biochemical protection systems against oxidative stress, consisting of an unbalance state between oxygen reactive chemical species and antioxidant defense production; this kind of biochemical stress has been shown to contribute to cellular senescence and the development of different diseases. In the reproductive field, the spermatic cells undergo a serial of physiological changes during the maturation, capacitation and fertilization process. Such changes include the modification of proteins regulated by signals from the sperm environment, where ROS modulate important biochemical pathways involved in fundamental processes of sperm function, and that could be altered under oxidative stress conditions. The objective of this review is to describe some of the processes that contribute to oxidative stress and its implications on sperm functionality.

Efecto de los factores solubles de Staphylococcus aureus, Staphylococcus capitis y Staphylococcus epidermidis sobre la funcionalidad espermática / Effect of soluble factors of Staphylococcus aureus, Staphylococcus capitis and Staphylococcus epidermidis on sperm functionality

ANTECEDENTES: La interacción entre los espermatozoides con algunas especies bacterianas o sus factores solubles influyen en el deterioro de la calidad seminal, alterando la función reproductiva del hombre. OBJETIVO: El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de los factores solubles de Staphylococcus aureus, Staphylococcus capitis y Staphylococcus epidermidis sobre la calidad seminal. MÉTODO: Los factores solubles producto del metabolismo bacteriano de las cepas de S. aureus y S. Capitis sensible a oxacilina y S. aureus y S. Epidermidis resistente a oxacilina se incubaron con las muestras de semen de 20 voluntarios y se cuantificaron los parámetros seminales convencionales y funcionales por microscopía y citometría de flujo, respectivamente. RESULTADOS: Se observó una disminución en la movilidad espermática con los factores solubles de S. aureus, esta disminución fue mayor con la cepa sensible y el efecto negativo sobre la movilidad fue inmediato. Al incubar los espermatozoides con los factores solubles de S. aureus sensible a oxacilina, se afectaron todos los parámetros funcionales excepto la integridad de la cromatina y se observó menor liberación de especies reactivas de oxígeno; con los factores solubles de la cepa de S. aureus resistente a oxacilina se observó una disminución en la lipoperoxidación de membrana y en la expresión de anexina V. CONCLUSIÓN: Este estudio da cuenta del efecto negativo de los factores solubles de la bacteria S. aureus tanto sensible como resistente a oxacilina sobre los parámetros espermáticos convencionales y funcionales, y por ende en su función reproductiva.

BACKGROUND: The interaction between sperm with some bacteria species and their soluble factors are the deterioration of semen quality by altering the reproductive function of man. AIM: The aim of this study was to determine the effect of soluble factors Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus capitis on semen quality. METHODS: The soluble factors product of bacterial metabolism of the strains of S. aureus and S. capitis methicillin sensitive and S. aureus and S. epidermidis resistant to oxacillin, were incubated with semen samples from 20 volunteers. Subsequently, conventional seminal parameters were measured and functional quantified by microscopy and flow cytometry, respectively. RESULTS: A decrease was observed in sperm motility with soluble factors of S. aureus, this decrease was higher with the sensitive strain that with oxacillin resistant strain and the negative effect on motility was immediate. By incubating the sperm with soluble factor from oxacillin-sensitive S. aureus, all functional parameters were affected except the chromatin integrity and reduced release of reactive oxygen species, mean fluorescence intensity in oxacillin resistant S. aureus strain was decrease in membrane lipid peroxidation and annexin V expression. CONCLUSIONS: This study reports the negative effect of soluble factors of bacteria either S. aureus sensitive and resistant to oxacillin, over conventional and functional sperm parameters, and therefore in their reproductive function.

La importancia clínica del ADN espermático en el análisis seminal cotidiano / The clinical importance of spermatic DNA in seminal analysis

El objetivo de este reporte es resaltar la importancia de las pruebas funcionales para evaluar la calidad seminal durante el análisis seminal de rutina. Se analizó mediante citometría de flujo el potencial mitocondrial, la integridad de la membrana espermática, la producción de especies reactivas del oxígeno y la suceptibilidad de fragmentación del ADN espermatico, en un paciente que consultó por infertilidad al Grupo Reproducción de la Universidad de Antioquia. Se encontró una producción basal de especies reactivas del oxígeno junto con una actividad mitocondrial alto y un porcentaje elevado de espermatozoides con su membrana plasmatica integra, siendo estos indicadores de una buena calidad espermática; no obstante, se observó una elevada suceptibilidad de fragmentación del material genético (DFI=42%). A pesar que un hombre aparentemente manifiesta características espermáticas de un individuo sano puede que la calidad del material genético de sus espermatozoides esté incidiendo sobre su éxito reproductivo.

The aim of this report is highlighting the importance of functional tests to evaluate semen quality during routine semen analysis. Mitochondrial function, membrane integrity, intracellular reactive oxygen species production and sperm DNA fragmentation were evaluated by flow cytometry in a infertil patient from Reproduction Group at the University of Antioquia.A basal production of reactive oxygen species and mitochondrial activity, and a high percentage of sperm with integrated plasma membrane was found, all indicators of good sperm quality; however, a high susceptibility of genetic material fragmentation (DFI=42%) was observed. Although a men apparently manifested sperm characteristics of a healthy individual may that the quality of genetic material in the spermcells is impacting on their reproductive success.

Evaluación de parámetros seminales no convencionales en individuos cuyas parejas presentan muerte embrionaria temprana recurrente: en busca de un valor de referencia / Evaluation of atypical semen parameters in individuals whose couples had a history of early recurrent embryo death: in search for a reference value}

Introducción. En estudios previos se relacionaron las alteraciones en los parámetros espermáticos no convencionales con la presencia de muerte embrionaria temprana recurrente de la pareja; debido a esto, se planteó la necesidad de establecer un valor de referencia de utilidad clínica para el manejo de estos pacientes. Objetivo. Evaluar los parámetros seminales convencionales y las pruebas funcionales de lipoperoxidación de las membranas espermáticas, capacidad antioxidante del plasma seminal e integridad de la cromatina espermática, en individuos cuyas parejas presentan muerte embrionaria temprana recurrente, con el fin de obtener un valor de referencia y poder identificar aquellos individuos en quienes la disminución de la fertilidad se pueda demostrar con estas pruebas. Materiales y métodos. Se evaluaron los parámetros espermáticos convencionales y no convencionales de 47 muestras de semen, de las cuales, 36 pertenecían al grupo de individuos con disminución de la fertilidad por historia de muerte embrionaria temprana recurrente en sus parejas, y 11 muestras de individuos sanos con fertilidad reciente. Resultados. Mediante el análisis discriminante se obtuvo una función que permitió clasificar los dos grupos analizados así: un valor menor de 0,50 para el 86,1 % de los individuos del grupo de muerte embrionaria temprana recurrente y un valor mayor de 0,50 para clasificar el 81,8 % de los individuos del grupo de fertilidad reciente. Conclusiones. Este valor de referencia de 0,5, basado en los resultados de los análisis espermáticos y utilizando el análisis discriminante, permitiría categorizar a los pacientes que consulten por historia de muerte embrionaria temprana en sus parejas y le ayudaría al médico a sugerir un tratamiento más enfocado en la posible causa de la disminución de la fertilidad.

Introduction. Previous studies related alterations in non-conventional seminal parameters with recurrent early embryonic death for one couple. A reference standard of clinical assessment is required for the management of these kinds of patients. Objective. Normal semen parameters were established based on functional tests including lipid peroxidation of sperm membranes, antioxidant capacity of seminal plasma and integrity of sperm chromatin to compare with men whose partners have recurrent early embryonic death. These parameters set reference values to identify subfertile individuals whose condition can be attributed to altered semen parameters. Materials and methods. The conventional and non-conventional semen parameters of 47 samples of semen were evaluated. Thirty-six samples were from subfertile individuals whose partners had a history of early recurrent embryo death, and 11 samples were from individuals with recent evidence of normal fertility. Results. By discriminant analysis, the two groups were classified as follows: a value below 0.50 for 86.1% of individuals in the group of recurrent early embryonic death, and a value above 0.50 to classify 81.8% of individuals in the group of recent fertility. Conclusions. This reference value of 0.5 based on the results of sperm tests can identify infertile male patients whose partners have a history of early embryonic death. This will aid the physician to suggest treatments more focused on the possible cause of subfertility.

Perfil inmunológico y resultado gestacional de pacientes con aborto recurrente de primer trimestre comparado con abortos de diferentes trimestres / Immunological profile and outcome of pregnancy of the first pregnancy after treatment in women recurrently aborting at different gestatioal ages

El objetivo de este estudio fue comparar si el número de abortos previos y la edad gestacional de estos abortos influía en el diagnóstico inmunológico y en resultado del tratamiento de las pacientes con aborto recurrente espontáneo. Para esto, se analizaron dos grupos de pacientes atendidas en el Programa de Reproducción de la Universidad de Antioquia, así: a) las que tenían sólo abortos de primer trimestre y b) las que presentaron sus abortos en diferentes trimestres. En estos grupos se comparó la frecuencia de autoanticuerpos (anticuerpos antifosfolípidos, anticoagulante lúpico y anticuerpos antinucleares), la frecuencia de aloinmunidad (carencia de factores bloqueadores del cultivo mixto de linfocitos) y el resultado gestacional de la primera gestación después de su ingreso al programa. Además, se analizó el antecedente de tener sólo dos abortos previos o tener tres o más. El perfil inmunológico y el resultado gestacional fue similar en los diferentes grupos

Citoquinas en reproduccion / Cytokines in reproductive events

Se presenta una revisión de la literatura sobre el papel de las citoquinas en diferentes eventos de la reproducción como la ovulación, la luteinización, la menstruación y la implantación. Se hace particular énfasis en las interacciones neuroinmunoendocrinas a través del eje hipotálamo-hipófisis-ovario y la interacción recíproca de las hormonas y las citoquinas. Además se resalta la importancia de los factores de crecimiento en el desarrollo de la unidad fetoplacentaria